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Batman e Robin cercano di sventare una rapina di diamanti al museo di Gotham, fallendo per una mossa avventata di Robin. Il responsabile è Mr. Freeze, ossia il ricercatore premio Nobel Victor Fries, vittima di un incidente di laboratorio: ora il suo corpo non può resistere se non a basse temperature. Il criminale decide di costruire un'arma congelante funzionante a diamanti, per ricattare la città affinché finanzi le sue ricerche per salvare la moglie, ibernata ed in attesa di cura, affetta dalla "Sindrome di McGregor".Contemporaneamente, in Sudamerica, lo scienziato Woodrue utilizza i risultati delle ricerche sui veleni della collega Pamela Isley al fine di creare un supersoldato da vendere a potenze straniere. La ragazza lo scopre, ribellandosi, e il dottore cerca di ucciderla seppellendola tra veleni e sostanze chimiche. Pamela sopravvive, ma quelle sostanze la modificano, rendendola velenosa e tuttuno con la natura: il suo nuovo nome è Poison Ivy. Vendicatosi dello scienziato, vola a Gotham con Flagello, l'esperimento di Woodrue.Intanto Barbara, la nipote del maggiordomo Alfred fa visita allo zio durante le vacanze scolastiche, e si ferma a casa Wayne. La giovane in realtà è stata espulsa dalla scuola, in quanto frequenta corse clandestine. Anche a Gotham partecipa ad una di queste, dove rischia la vita ma viene salvata da Dick. Per catturare Freeze viene organizzata una serata di beneficienza, dove saranno presenti anche Batman, Robin, e dei diamanti. Poison Ivy, anche lei intrufolatasi alla festa, irretisce con polvere di feromoni entrambi i supereroi. Il criminale esce allo scoperto e viene catturato dal pipistrello, ma verrà poi liberato da Ivy. Coalizzatosi con lui Freeze, uccide la moglie a sua insaputa, così da convogliare la sua rabbia sui presunti responsabili, ovvero Batman e l'intera Gotham in generale. Contemporaneamente si sopre che Alfred è vicino alla morte, malato anche lui della Sindrome di MacGregor. L'unico che può fare qualcosa è lo stesso Fries, oramai in procinto di condannare la città congelandola, deviando il rivoluzionario osservatorio appena inaugurato.Nello scontro finale si unirà anche Barbara, con l'identità di Batgirl, che scopre il segreto quando Alfred le chiede di rintracciare lo zio Wilfred, e di chiedergli di prenderne il posto al servizio dei Wayne. Batman e Freeze cominciano la lotta, con Freeze che pensa ancora che sia stato Batman ad uccidere sua moglie. Batman mostra a Freeze un filmato in cui Ivy lotta con Batgirl e le dice che è stata lei a staccare la spina. Freeze viene informato da Batman che sua moglie non è mortaed è stata trasferita ad Arkham aspettando che lui finisca la ricerca. Batman chiede a Freeze la cura per il primo stadio della sindrome di MacGregor. Freeze consegna la sua medicina a Batman, che al castello cura Alfred. Ivy viene mostrata imprigionata ad Arkham e Freeze entra, informandola che è il suo nuovo compagno di cella e ha intenzione di rendere la sua vita un inferno per aver quasi provocato la morte di sua moglie. Il mattino seguente Alfred si sveglia, vivo e vegeto. Tutti sono d'accordo a far rimanere Barbara in famiglia, che insieme a Batman e Robin contribuirà alla lotta contro il crimine.